Dados do Trabalho

Título

Avaliação de metástases hepáticas murinas em modelo de câncer de mama pós modulações quimiogênicas

Introdução

Atualmente, o câncer de mama é o tipo de câncer mais diagnosticado no mundo. Apenas no ano de 2020, houveram cerca de 2,3 milhões diagnósticos e 685 mil mortes em decorrência da doença, sendo a causa mais comum de morte por câncer em mulheres. O microambiente tumoral da mama é complexo, incluindo fibras nervosas. Contudo, ainda não é claro a participação dos nervos sensoriais na progressão dos tumores mamários, bem como no perfil metastático.

Objetivo

O trabalho tem como objetivo analisar o perfil histológico metastático na linhagem de câncer de mama murino (E0771) em camundongos fêmeas Nav1.8Cre+/hM3Dq+ após 28 dias de exposição a N-óxido de clozapina (CNO).

Métodos

Camundongos fêmeas Nav1.8Cre+/hM3Dq+ com idades entre 10 e 12 semanas (n=6) foram inoculadas ortotopicamente com células E0771 1x106 diluídas em 50 µL de PBS. Essas fêmeas foram acompanhadas e a inervação sensorial foi ativada usando clozapina N óxido via intraperitonial diariamente por 28 dias, fêmeas do grupo controle Nav1.8Cre-/hM3Dq+ (n=6) foram igualmente tratadas. Para confirmar a eficiência da ativação dos nervos sensoriais, os camundongos foram submetidos a testes comportamentais para medir as respostas térmicas (Tail Flick) e mecânicas (Randall e Selitto).
Após esse período os animais foram eutanasiados e os órgãos considerados nichos metastáticos importantes - fígado, cérebro e fêmur - foram retirados, processados histologicamente. Em seguida, as lâminas foram fotografadas (20 fotos/animal) em microscópio óptico na lente objetiva de 40x e submetido a análise quantitativa e qualitativa no ImageJ e análise estatística no Prisma 8.0. Os experimentos foram aprovados pelo CEUA/UFMG (Protocolo 69/2023).

Resultados

Nossos resultados preliminares demonstram que, as áreas metastáticas no fígado foram menores no grupo com super ativação (Nav1.8Cre+/hM3Dq+) do nervo sensorial quando comparado com o grupo controle (Nav1.8Cre-/hM3Dq+), essas médias foram inferiores a 0,004mm. Contudo, os focos metastáticos são bastante significativos, no grupo controle em relação ao grupo super ativado, no grupo controle observamos de 36 ± 40 focos, enquanto no grupo tratado observamos de 20 ± 36 focos. Nas análises também observamos que o número de células inflamatórias infiltradas nas metástases foi maior no grupo tratado 286 ± 647 células em relação ao grupo controle 162 ± 264 células. A ativação dessas terminações nervosas libera peptídeos vasoativos, como a Substância P, que podem modular o fluxo sanguíneo local e a atividade das células imunes. Isso sugere que a superexpressão de neuromediadores sensoriais locais pode alterar o fenótipo das células cancerosas no tumor primário, levando ao subcrescimento de subconjuntos metastáticos. Os resultados obtidos até o momento sugerem que a ativação dos canais Nav 1.8Cre em neurônios sensoriais pode induzir uma resposta imune anti metastática.

Conclusões

Em conclusão, as fibras nervosas sensoriais têm papel importante na defesa contra o carcinoma de mama metastático. Embora nossa pesquisa ainda esteja em desenvolvimento, a ativação dessas vias neurais pode ser eficaz no prognóstico do câncer. As perspectivas futuras são avaliar os outros nichos metastáticos e realizar análises mais robustas quanto ao infiltrado inflamatório para poder compreender melhor a participação das fibras nervosas.

Palavras-chave

câncer de mama murino; inervação sensorial; metástase

Financiador do resumo

Capes e Fapemig