Dados do Trabalho

Título

Criação da plataforma de estudos pré-clínicos para sarcomas de partes moles baseadas em Patient-Derived Xenografts

Introdução

Os sarcomas de partes moles (SPM) são neoplasias raras com diferentes padrões morfológicos de células mesenquimais. A disponibilidade de linhagens de camundongos imunodeficientes, como o NSG, fortaleceu os modelos de xenotransplante, permitindo explorar a heterogeneidade de comportamentos de determinados tumores, estudando suas características únicas e complementares na progressão tumoral, sendo bons preditores de resposta à terapia. Entretanto há poucos estudos envolvendo esses modelos de Patient derived xenograft (PDX) em SPM.

Objetivo

Estabelecer um modelo de PDX de SPM a partir de tumores de pacientes operados no A.C.C.C, implantados em camundongos NSG, e com os dados clínicos coletados construímos uma plataforma de estudos pré-clínicos baseadas nos PDX. Além disso, o estabelecimento de culturas primárias e a padronização para imortalização e criopreservação dessas células.

Métodos

Para estabelecer os modelos de PDX, foram recrutados 70 pacientes com sarcomas de partes moles, abrangendo diversos subtipos histológicos, mediante obtenção de consentimento informado por meio da assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. Posteriormente, as amostras coletadas foram empregadas para inoculação dos tumores em camundongos, seguido de monitoramento do crescimento tumoral, cultivo de culturas primárias dos tumores, a padronização para imortalização e criopreservação dessas células, além da caracterização detalhada por imunohistoquímica.

Resultados

Um total de 70 pacientes foram selecionados para este trabalho, 33 geraram PDX. Um TMA com os 33 tumores humanos e seus respectivos PDX foi confeccionado e caracterizado a partir de análises por imunohistoquímica. Das 70 amostras coletadas para o estudo, 21 apresentaram ausência de neoplasia, baixo grau (grau histológico 1) e realizou tratamento neoadjuvante; destes, não foi possível observar crescimento tumoral em nenhum caso. Com a exclusão dos casos, 49 com tumores viáveis, onde destes, 33 (67%) deram origem a PDX. Esse resultado é bastante próximo do que encontramos na literatura (76%) (Stebbing et al., 2014).
Além disso, o estabelecimento de culturas primárias destes tumores também foi realizado com a padronização de protocolos para imortalização e criopreservação dessas células.

Uma caracterização por imunohistoquímica dos principais marcadores para diagnóstico de SPM (Desmina, Citoceratina, CD34, CD99, Miogenina e S-100) foi realizado de todos os casos que geraram PDX e que foram incluídos no TMA tanto de pacientes quanto no TMA de PDX

Conclusões

O estabelecimento da plataforma baseada em PDX para sarcomas foi estabelecida com sucesso com taxa de 67% (33 PDX gerados), que foram caracterizados por imuno-histoquímica estão criopreservados em biorrepositório para projetos que busquem investigar aspectos da biologia destes tumores e para o desenvolvimento e triagem de novos/reposicionamento de fármacos.

Palavras-chave

Sarcoma de partes moles, PDX, xenotransplante.