Dados do Trabalho

Título

INIBIÇÃO DO NF-KB COMO TERAPIA ALVO-DIRIGIDA PARA EPENDIMOMAS SUPRATENTORIAIS ZFTA-RELA POSITIVOS

Introdução

A desregulação do fator de transcrição NF-kB (formado por homo- e heterodímeros de membros da família REL) participa de diversos processos associados à oncogênese, como a regulação da proliferação, apoptose e diferenciação, podendo ainda atenuar a quimioterapia ou radioterapia. Nos ependimomas supratentoriais, a sua desregulação se dá pela presença do gene de fusão ZFTA-RELA, o qual decorre num pior prognóstico.

Objetivo

Analisar os efeitos in vitro dos inibidores sintéticos de NF-kB, DHMEQ e SEMBL, em linhagem celular de ependimoma supratentorial positiva a para a translocação t(11q13.1;11q13).

Métodos

A linhagem celular BXD-1425, cultivada em meio DMEM (com SBF e antibióticos) a 5% CO2 a 37°C foi semeada em placa de 96 poços e tratada com diferentes concentrações dos inibidores (1,25, 2,5, 5, 10 e 20 μg/ml) por 24, 48 e 72 h. Em seguida, a viabilidade celular foi mensurada por meio do ensaio da resazurina a 570 nm. Para o teste de adesão, 5x103 células foram plaqueadas e tratadas por 48 horas com as doses de 1,25, 2,5 e 5 μg/ml. Depois, foram lavadas com PBS 1X e levadas ao agitador orbital por 3 minutos. As células foram então fixadas com metanol e a massa celular avaliada através da coloração com Giemsa e leitura em espectrofotometro a 655 nm. Concomitante, para ensaio de migração por quimioatraente, 25x103 células foram plaqueadas no compartimento superior da câmara de Boyden e após 24 h sob tratamento (1,25, 2,5 e 5 μg/ml) os efeitos sobre a capacidade motora foram avaliados pela contagem de células que migraram para a câmara inferior com o auxílio do ImageJ.

Resultados

Os resultados mostraram que ambos os inibidores foram capazes de reduzir a proliferação celular, com algumas diferenças entre si. Assim como também diminuir a migração por quimioatraente e a adesão celular. Entretanto, o SEMBL atuou de maneira dose-dependente ao tempo que o DHMEQ foi eficaz somente na maior dose utilizada de 5 μg/ml.

Conclusões

Nossos resultados demonstram que a inibição do NF-kB induz uma diminuição da proliferação, migração e adesão da linhagem celular BXD-1425. As diferenças nas respostas individuais podem decorrer dos diferentes mecanismos de ação. O DHMEQ, inibe a translocação nuclear dos dímeros, ao tempo que o SEMBL (com maior lipofilicidade) inibe a ligação do RELA ao DNA. Dessa forma, NF-kB se configura como um alvo terapêutico promissor para terapia alvo-dirigida em ependimomas positivos para ZFTA-RELA.

Palavras-chave

Ependimoma, Inibição do NF-kB, Novas Terapias

Financiador do resumo

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo