Dados do Trabalho

Título

Expressão de CK20 e MUC1 em pacientes com câncer gástrico

Introdução

A recorrência hematológica é a segunda principal causa de falha do tratamento do câncer gástrico. Assim, a detecção de marcadores tumorais circulantes no sangue periférico, utilizando a técnica de reação em cadeia da polimerase em tempo real (qRT-PCR), pode ser uma ferramenta relevante para predizer recidiva e prognóstico do paciente. No entanto, o impacto na sobrevida com o uso de qRT-PCR para a pesquisa de marcadores gênicos no sangue periférico ainda não é bem estabelecido.

Objetivo

Avaliar a expressão dos marcadores CK20 e MUC1 em amostras de sangue periférico de pacientes com câncer gástrico, pelo uso de qRT-PCR e verificar a associação com parâmetros clínicopatológicos e sobrevida.

Métodos

Um total de 31 pacientes com adenocarcinoma gástrico e indicação de cirurgia potencialmente curativa foram prospectivamente incluídos e submetidos à coleta de sangue periférico no dia da cirurgia. O RNA total foi isolado com reagente Trizol®, submetido à quantificação por espectrofotômetro NanoDrop™ ND-1000 (adotada razão de absorbância 260/280 nm ≥ 1.8 como aceitável) e à análise de integridade por eletroforese. cDNA foi obtido utilizando-se Kit High Capacity RNA-to-cDNA e as reações foram incubadas a 37 °C por 60 min e depois a 95 °C por 5 min em termociclador GeneAmp 2400. A expressão dos marcadores foi analisada por qRT-PCR no termociclador StepOnePlusTM, utilizando-se os ensaios TaqMan® Gene Expression Assays. Os valores da quantificação relativa foram calculados pelo método Delta-Delta Comparative Threshold (ΔΔCt) com controle endógeno para normalizar os dados. Houve aprovação pela Comissão de Ética em Pesquisa e registro na Plataforma Brasil (CAEE: 19912713.2.0000.0065).

Resultados

58,4% dos pacientes da coorte eram homens, a média de idade foi de 59,9 anos, 77,4% foram submetidos a gastrectomia subtotal e 93,5% por linfadenectomia D2. O tipo intestinal foi o tipo histológico mais comumente encontrado, a maioria dos pacientes foi estadiada como pTNM III (38,7%). Não foram encontradas associações estatisticamente significantes (p>0.05) na comparação entre os níveis de expressão de CK20 com características clínicas, patológicas e cirúrgicas. Maiores níveis de expressão de MUC1 expression se associaram com pacientes do sexo feminino (p=0.01). Houve correlação entre os níveis de expressão de ambos os genes (R= 0.81, p<0.001), assim como entre nível de CK20 e tamanho tumoral (R=0.39, p=0.034). Onze pacientes apresentaram recorrência de doença e 12 pacientes vieram a óbito numa média de seguimento de 38,5 meses (±23.6), entretanto não houve diferença na sobrevida global e sobrevida livre de doença de acordo com a expressão de CK20 e MUC1.

Conclusões

Os genes MUC1 e CK20 foram detectados no sangue periférico total de pacientes com câncer gástrico submetidos à cirurgia potencialmente curativa através da técnica de qRT-PCR. Houve correlação entre o nível de expressão de CK20 com os de MUC1, assim como com tamanho do tumor. Não houve diferença na sobrevida global e sobrevida livre de doença de acordo com ambos marcadores genéticos no presente estudo.

Palavras-chave

Câncer Gástrico, Biomarcadores Tumorais, Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa

Financiador do resumo

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - Processo 2021/05357-0