Dados do Trabalho

Título

A análise transcriptômica identificou ezrina como um potencial alvo farmacológico em células de câncer cervical e gástrico

Introdução

O carcinoma cervical é o 4º câncer mais comum em mulheres e as opções de tratamento para o estágio avançado são limitadas, levando à alta mortalidade, enquanto o câncer gástrico é o 5º mais comum no mundo e apresenta taxas globais de sobrevida em 5 anos de cerca de 25% a 30%. A proteína ezrina, codificada pelo gene EZR, atua em múltiplos processos celulares incluindo proliferação, sobrevivência e motilidade, através da transdução de sinal entre receptores de membrana e o citoesqueleto de actina.

Objetivo

Investigar o impacto da expressão de EZR sob os desfechos de sobrevida, características clínicas e funções biológicas em pacientes com carcinoma cervical e gástrico da coorte do TCGA e caracterizar o potencial antineoplásico da inibição farmacológica de ezrina, em linhagens celulares destes tumores.

Métodos

Foram utilizados dados de sequenciamento de RNA, características e desfechos clínicos de pacientes com câncer gástrico e cervical depositados no cBioPortal for Cancer Genomics. O teste de Log-rank foi usado para estimativas de sobrevida. Os transcritos de RNAseq das coortes do TCGA foram pré-classificados de acordo com sua expressão diferencial, comparando amostras com alta e baixa expressão de EZR. A análise de enriquecimento gênico foi realizada para identificar vias de sinalização relacionadas à expressão de EZR. FDR<0.25 e p valor<0.05 foram considerados estatisticamente significativos. Foram cultivadas células derivadas de câncer cervical (A-431) e gástrico (AGS e HGC-27), em meio de cultura recomendado pela ATCC para análises in vitro de viabilidade celular(ensaio de MTT), clonogenicidade(ensaio de formação de colônias marcadas com cristal violeta), morfologia(microscopia de fluorescência marcando o citoesqueleto de actina), expressão gênica(RT-qPCR) e proteica(Western blotting).

Resultados

A alta expressão de EZR no câncer cervical apresentou tendência (p=0.06) de impactar negativamente a sobrevida(piores desfechos clínicos).O fenótipo de alta expressão teve enriquecimento de homeostase do colesterol, resposta ao estrógeno e sinalização NFκB no câncer cervical; e replicação de DNA, fase mitótica, sinalização mTOR, UPR e ROS no gástrico. Em ambos os tumores, está associado à redução de junção celular, aumento de motilidade, locomoção e migração. A inibição de EZR diminuiu a expressão de MCL1(anti-apoptótico) e CCNA2(associado ao ciclo celular) na linhagem cervical, e aumentou a expressão de genes relacionados à autofagia (SQSTM,ATG7,BNIP3L) e pró-apoptoticos(BAD) nas linhagens gástricas. Doses baixas do inibidor associaram-se a aumento de morte celular e de dano ao DNA, além de reduzir proliferação e formação de colônias em ambos os cânceres. Observou-se presença de células com núcleos picnóticos, fragmentação do DNA e formação dos corpos apoptóticos e corpos de inclusão.

Conclusões

Os resultados obtidos fornecem evidências promissoras de que o EZR pode ser um importante alvo molecular no tratamento do carcinoma cervical e gástrico. Esta identificação abre caminho para o desenvolvimento de futuros ensaios clínicos que explorem a eficácia deste inibidor em doentes com esta patologia. Uma abordagem direcionada a essa molécula oferece uma perspectiva para o desenvolvimento de tratamentos mais eficazes e menos invasivos, visando uma melhor qualidade de vida destes pacientes.

Palavras-chave

Ezrina, carcinoma cervical, adenocarcinoma gástrico

Financiador do resumo

FAPESP (#2022/14505-6)