Dados do Trabalho

Título

KRAS-G12C: Um biomarcador negligenciado para identificar indivíduos com Polipose Associada ao MUTYH

Introdução

A Polipose Associada ao MUTYH (MAP) é uma síndrome recessiva responsável por 0,7% de todos os cânceres colorretais (CCR) que é causada por variantes germinativas patogênicas (VGPs) no gene MUTYH. Quando esse gene está mutado, gera transversões G:C-T:A em diversos genes drivers de CCR, como KRAS e PIK3CA. Em KRAS, a mutação somática rara em CCR esporádicos c.34G>T; G12C está presente em mais de 80% dos pacientes MAP. Estudos recentes demonstraram que a presença de KRAS-G12C ou de PIK3CA-Q546K, também rara em CCR esporádicos, apresenta sensibilidade de quase 90% na detecção de MAP.

Objetivo

O objetivo principal do estudo é avaliar a taxa de detecção de variantes germinativas patogênicas no gene MUTYH em pacientes com câncer colorretal e mutação somática KRAS-G12C, além de avaliar a sensibilidade e utilidade de se investigar KRAS-G12C e PIK3CA-Q546K para classificar variantes germinativas de significado incerto (VUS) em MUTYH.

Métodos

Para isso, serão extraídos DNA de tumor fresco, tumor fixado em formalina e emblocado em parafina e leucócito. Para o primeiro objetivo, serão avaliadas as 5 variantes mais comuns de MUTYH na população brasileira (p.Tyr151Cys, p.Gly368Asp, p.Arg213Trp, p.Ala357fs e deleção dos éxons 4 a 16) através de PCR multiplex seguida por sequenciamento de nova geração de amplicons. Pacientes com apenas uma variante em heterozigose serão avaliados por sequenciamento completo do gene MUTYH. Para o segundo objetivo, iremos avaliar a frequência de detecção das mutações somáticas KRAS-G12C e PIK3CA-Q546K em tecidos de adenomas e CCR de indivíduos diagnosticados com MAP (controles positivos) e de indivíduos suspeitos para MAP (com presença de VUS em MUTYH). Após a revisão de regras da ACMG (American College of Medical Genetics), dados clínicos dos pacientes e comparação com controles, analisaremos se há suporte de reclassificação da variante ou não. CEP: 3153/21

Resultados

Até o momento, de um total de 4.139 testes KRAS realizados, identificamos 115 pacientes com CCR e mutação KRAS-G12C. Noventa e oito pacientes já foram submetidos ao sequenciamento multiplex, dos quais 12 (12,2%) possuíam pelo menos uma VGP em MUTYH. Dos 12 pacientes, 8 possuíam VGPs bialélicas, sendo classificados como MAP, e 4 foram classificados como monoalélicos. A taxa de detecção da MAP em pacientes com menos de 60 anos foi de 15% (7/47). Onze desses indivíduos possuíam dados clínicos disponíveis, sendo que 10 (83,3%) apresentavam pólipos (variando de 1 a múltiplos), 5 (41,6%) possuíam história familiar para CCR e a média de idade de aparecimento do câncer foi de 53 anos. Para o segundo objetivo, até o momento, analisamos adenomas e CCRs de 11/18 pacientes MAP que serão utilizados como controles positivos. Destes, 81,8% apresentaram a mutação KRAS-G12C, enquanto 18,1% apresentaram a mutação PIK3CA-Q546K. A detecção de KRAS-G12C foi de 28,5% em adenomas e 100% em adenocarcinomas; para PIK3CA-Q546K, não houve detecção em adenomas e 28,5% dos adenocarcinomas foram positivos.

Conclusões

A alta taxa de detecção de VGPs bialélicas em MUTYH nos pacientes com CCR e KRAS-G12C (8%), em especial em pacientes com CCR abaixo de 60 anos (15%), indica que a presença dessa mutação deve ser considerada como biomarcador para direcionar o diagnóstico da MAP. Pretendemos, por fim, prosseguir com as análises pendentes.

Palavras-chave

Polipose Associada ao MUTYH; KRAS G12C; Câncer colorretal.

Financiador do resumo

CAPES; Collaborative Group of Americas on Inherited Gastrointestinal Cancer.